สิ่งที่ทำให้บัฟเฟอร์ฟอสเฟตโดดเด่นได้อย่างไร? ประการแรกเนื่องจากมีกรดนิวคลีอิกอยู่สามตัวกรดฟอสฟอริกมีค่า dissociation หลายตัวและสามารถใช้เพื่อสร้างบัฟเฟอร์สำหรับทั้งสามค่าที่สอดคล้องกัน
ค่าพีคคาพี 3 ของกรดฟอสฟอรัส (จากคู่มือซีซีอาร์ของเคมีและฟิสิกส์) มีค่าเท่ากับ 2.16, 7.21 และ 12. 32. โมโนโซเดียมฟอสเฟตและฐานสังเคราะหของไดโซเดียมฟอสเฟตมักใชในการสรางบัฟเฟอร์ของ pH ค่าประมาณ 7 สำหรับการใช้งานทางชีวภาพดังแสดงในที่นี้
การทำบัฟเฟอร์นี้ทำได้ยากกว่าการทำ TAE และ TBE buffers ไม่ใช่เรื่องยากมากนัก เฉลี่ยเพียง ควรใช้เวลาประมาณ 10 นาทีเพื่อกระตุ้นบัฟเฟอร์นี้ นี่เป็นวิธีการ
1 ตัดสินใจเกี่ยวกับบัฟเฟอร์คุณสมบัติ
ก่อนที่จะทำการบัฟเฟอร์คุณควรรู้ว่าคุณต้องการให้ได้ระดับโมเลกุลเท่าไร บัฟเฟอร์ส่วนใหญ่ทำงานได้ดีที่สุดที่ความเข้มข้นระหว่าง 0-1 M และ 10 M ค่า pH ควรอยู่ในหน่วย pH 1 หน่วยของกรด / conjugate base pKa เพื่อความเรียบง่ายการคำนวณตัวอย่างนี้จะใช้สำหรับบัฟเฟอร์ 1 ลิตร
2 จงหาสมการ Henderson-Hasselbalch (ด้านล่าง) เพื่อหาอัตราส่วนของกรดกับเบสที่ต้องการในการสร้างบัฟเฟอร์ของค่า pH ที่ต้องการ ใช้ค่า pKa ใกล้กับค่า pH ที่ต้องการและอัตราส่วนนี้จะอ้างอิงถึงคู่ conjugate ของกรด - เบสที่สอดคล้องกับ pKa นั้น
HH สมการ: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])
สำหรับบัฟเฟอร์ของ pH 6. 9 [Base] / [Acid] = 0.4898
ความเป็นโมฆะที่ต้องการของบัฟเฟอร์คือผลรวมของ [Acid] + [Base]
สำหรับบัฟเฟอร์ 1 M, [Base] + [Acid] = 1 และ
[Base] = 1 - [Acid] โดยการแทนที่สมการอัตราส่วนนี้จากขั้นตอนที่ 2 คุณจะได้รับ: [Acid] = 0. 6712 moles / L
แก้ปัญหาสำหรับ [Acid]
ใช้สมการ: [Base] = 1 - [Acid] คุณสามารถคำนวณได้ว่า
[Base] = 0 3288 moles / L
3. หลังจากที่คุณใช้สมการ Henderson-Hasselbalch เพื่อหาอัตราส่วนของกรดกับเบสในบัฟเฟอร์ของคุณให้เตรียมสารละลายเพียง 1 ลิตรโดยใช้ปริมาณโมโนโซเดียมฟอสเฟตและไดโซเดียมฟอสเฟตที่ถูกต้อง .
4 ตรวจสอบค่า pH
ใช้หัววัดค่า pH เพื่อยืนยันว่าได้ค่า pH ที่ถูกต้องสำหรับบัฟเฟอร์ ปรับเล็กน้อยเมื่อจำเป็นโดยใช้กรดฟอสฟอรัสหรือโซเดียมไฮดรอกไซด์ (NaOH)
5 แก้ไขปริมาตร
เมื่อได้ค่า pH ที่ต้องการแล้วให้นำปริมาตรของบัฟเฟอร์มาอยู่ที่ 1 ลิตร จากนั้นเจือจางบัฟเฟอร์ตามต้องการ บัฟเฟอร์เดียวกันนี้สามารถเจือจางเพื่อสร้างบัฟเฟอร์ของ 0 5 M, 0 1 M, 0 05 M หรืออะไรก็ได้ระหว่าง
6 เคล็ดลับสำหรับบัฟเฟอร์
โปรดจำไว้ว่า pKa ไม่สามารถวัดค่าได้อย่างง่ายดายค่าที่แตกต่างกันเล็กน้อยอาจมีอยู่ในวรรณคดีจากแหล่งต่างๆ
7 สิ่งที่คุณต้องการ
ในการทำบัฟเฟอร์คุณจะต้องใช้สาร 3 ชนิดในขณะที่วัสดุเหลือใช้เป็นอุปกรณ์ สารเหล่านี้ ได้แก่ โซเดียมฟอสเฟตโซเดียมฟอสเฟตและกรดฟอสฟอรัสหรือโซเดียมไฮดรอกไซด์เพื่อปรับ pH
นอกจากนี้คุณยังต้องมีเครื่องวัดค่า pH และสอบสวนและอุปกรณ์ที่เหมาะสม ซึ่งรวมถึงขวดปริมาตรกระบอกสูบกระบอกสูบ beakers และบาร์กวน
สุดท้ายคุณต้องมีเตาร้อน