วิธีการสร้างบัฟเฟอร์ TAE ในอีกสองสามขั้นตอน

บัฟเฟอร์ TAE เป็นสารละลายที่ประกอบด้วยฐาน Tris, กรดอะซิติกและ EDTA (Tris-acetate-EDTA) เป็นบัฟเฟอร์ที่พบมากที่สุดในอดีตที่ใช้ในการวิเคราะห์ผลึกของผลิตภัณฑ์ดีเอ็นเอที่เกิดจากการขยาย PCR โปรโตคอลการทำให้บริสุทธิ์ของดีเอ็นเอหรือการทดลองการโคลนนิ่งดีเอ็นเอ

บัฟเฟอร์นี้มีความอิออนต่ำและมีความสามารถในการเก็บบัฟเฟอร์ต่ำ เหมาะที่สุดสำหรับการอิเล็กโตรโฟเรซิสของดีเอ็นเอขนาดใหญ่ (> 20 กิโลไบต์) และจะต้องมีการเปลี่ยนใหม่บ่อยครั้งหรือหมุนเวียนเพื่อให้สามารถใช้งานเจลได้นาน (> 4 ชั่วโมง)

ด้วยเหตุนี้คุณอาจต้องการพิจารณาหลายบัฟเฟอร์ของบัฟเฟอร์

ระบุได้ว่าบัฟเฟอร์ทำได้ง่ายและสามารถดำเนินการได้อย่างรวดเร็วทำให้มากกว่าหนึ่งชุดในแต่ละครั้งไม่ควรใช้เวลานานหรือยากที่จะดึงออก การใช้คำแนะนำด้านล่างนี้จะใช้เวลาเพียง 30 นาทีในการสร้างบัฟเฟอร์ TAE นี่คือวิธี:

เตรียมโซลูชันสต็อกของ EDTA

สารละลาย EDTA (ethylenediamine tetraacetic acid) เตรียมตัวก่อนเวลา EDTA จะไม่เข้าสู่สารละลายจน pH ถูกปรับประมาณ 8 0. สำหรับสารละลายสต็อกที่มีปริมาตร 500 มิลลิลิตรเท่ากับ 0. 5 M EDTA ให้น้ำหนัก 93. 05 กรัม EDTA disodium salt (FW = 372. 2) ) ละลายในน้ำ deionized 400 มิลลิลิตรและปรับ pH ด้วย sodium hydroxide (NaOH) เติมสารละลายให้เป็นปริมาตรขั้นสุดท้าย 500 มิลลิลิตร

แส้ตสต็อกของ TAE

สร้างสารละลาย TAE ที่เข้มข้น (50x) โดยชั่งน้ำหนัก 242 กรัมของ Tris base (FW = 121. 14) และละลายในประมาณ 750 มิลลิลิตรของน้ำ deionized

เพิ่มกรด 57. 1 มิลลิลิตรของกรดน้ำแข็งและ 100 มิลลิลิตรของ 0. 5 M EDTA (pH 8. 0) หลังจากนั้นให้ปรับสารละลายให้เป็นปริมาตรขั้นสุดท้าย 1 ลิตร สารละลายสต็อกนี้สามารถเก็บรักษาได้ที่อุณหภูมิห้อง pH ของบัฟเฟอร์นี้จะไม่ปรับและควรจะประมาณ 8. 5. 999 เตรียมโซลูชันการทำงานของ TAE

การแก้ปัญหาการทำงานของบัฟเฟอร์ TAE 1x ทำได้เพียงแค่ทำให้สารละลายสต็อกลดลง 50x ในน้ำที่มี deionized

ความเข้มข้นของตัวทำละลายขั้นสุดท้ายคือ 40 mM Tris acetate และ 1 mM EDTA ขณะนี้บัฟเฟอร์พร้อมสำหรับใช้เจล agarose แล้ว

สิ่งที่คุณต้องการสำหรับบัฟเฟอร์

เนื่องจากการทำให้ชุดบัฟเฟอร์ TAE ต้องใช้ชุดคำสั่งอย่างรวดเร็วและเรียบง่ายปริมาณวัสดุที่จำเป็นสำหรับการใช้งานนั้นไม่มากเกินไป คุณจำเป็นต้องใช้ EDTA เกลือโซเดียมฐาน Tris และกรดอะซิติกน้ำแข็ง

การทำบัฟเฟอร์ต้องใช้เครื่องวัดค่า pH และมาตรฐานการสอบเทียบตามความเหมาะสม นอกจากนี้คุณยังต้องใช้ 600 มิลลิลิตรและ 1500 มิลลิลิตรบีกเกอร์หรือขวดรวมทั้งกระบอกสูบที่สำเร็จการศึกษา สุดท้ายคุณจะต้องน้ำ deionized, กวนบาร์และแผ่นกวน

การหีบห่อ

คุณต้องการทำบัฟเฟอร์ที่ใดในที่ตั้งโรงเรียนสถานที่ทำงานหรือที่ตั้งอื่น ๆ เช่นที่บ้านของคุณหรือไม่?ตรวจสอบพื้นที่โฆษณาก่อนที่คุณจะเริ่มตรวจสอบว่ามีวัสดุทั้งหมดสำหรับ TAE buffer

หากคุณไม่ต้องการจ่ายค่าวัสดุให้เลือกใช้บัฟเฟอร์นอกบ้านของคุณ คุณสามารถสั่งซื้อวัสดุที่คุณต้องการได้แบบออนไลน์หรือไปที่ร้านพิเศษสำหรับพวกเขา